不飽和脂肪酸C=C位置異構(gòu)體的準(zhǔn)確鑒定和定量對于研究其在疾病模型中的生物功能至關(guān)重要。北京中醫(yī)藥大學(xué)高曉燕教授團(tuán)隊提出新型穩(wěn)定同位素標(biāo)記的雙衍生化方法以獲得準(zhǔn)確的C=C特征離子對提升不飽和脂肪酸鑒定和相對定量的準(zhǔn)確性，并將其應(yīng)用于大黃干預(yù)糖尿病認(rèn)知功能障礙模型大鼠血清中脂肪酸的全面表征，為疾病模型中生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)提供新的分析策略。
該研究基于d0/d9-5-氨基-N,N,N -三甲基戊烷-1-碘化銨（d0/d9-ATPAI）標(biāo)記羧基和間氯過氧苯甲酸標(biāo)記C=C鍵的雙衍生化策略用于同時實現(xiàn)脂肪酸的鑒定和相對定量。新型d0/d9-ATPAI穩(wěn)定同位素標(biāo)記季胺基團(tuán)可提高特征離子對識別的準(zhǔn)確性，促進(jìn)多種脂肪酸的結(jié)構(gòu)注釋。重同位素標(biāo)記的脂肪酸作為內(nèi)標(biāo)物，采用d0/d9-脂肪酸衍生物產(chǎn)生的特征離子對的峰面積比實現(xiàn)樣品中不飽和脂肪酸C=C位置異構(gòu)體準(zhǔn)確的相對定量。該分析策略將脂肪酸的檢測靈敏度提高60,000倍，實現(xiàn)大鼠血清中70種游離脂肪酸的準(zhǔn)確鑒定，包括26種不飽和脂肪酸C=C位置異構(gòu)體。糖尿病認(rèn)知功能障礙模型大鼠血清中脂肪酸的擬靶向代謝組學(xué)分析揭示了疾病發(fā)展過程中脂肪酸代謝途徑的改變。該研究相關(guān)內(nèi)容以“Enhancing the accuracy of identification and relative quantification of unsaturated fatty acids in serum via a stable isotope-labeled double derivatization strategy”為題發(fā)表于自然指數(shù)期刊期刊Analytical Chemistry（https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.analchem.4c06375）。北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院博士生袁云霞為論文第一作者，高曉燕教授為通訊作者。該項研究工作得到了國家自然科學(xué)基金（U21A20407）和北京市自然科學(xué)基金（7222276）的資助。